Первый случай диагностики Nosema seranae на пасеке Томской области

Опубликовал: Petr_MS

Первый случай диагностики Nosema seranae на пасеке Томской области

Нозематоз — опасное заболевание медоносных пчел, широко распространенное во всем мире и периодически вызывающее массовую гибель пчелиных семей. Возбудителем являются микроспоридии рода Nosema — одноклеточные простейшие, паразитирующие в эпителиальных клетках средней кишки.

У медоносных пчел выделено два вида микроспоридий: вид N. apis, описанный Цандером более 100 лет назад, и новый возбудитель нозематоза N. сеrаnае, выявленный в 1996 г. у азиатской пчелы Apis cerana [4], а в 2006 г. — у Apis mellifera на территории Европы [5]. Микроспоридия N. сеrаnае — высоко патогенный возбудитель нозематоза, постепенно вытесняющий вид N. apis из популяций медоносных пчел. В настоящее время нозематоз типа С, вызываемый N. сеrаnае, рассматривается в качестве одной из основных причин коллапса пчелиных семей, наблюдаемого во всем мире в течение нескольких лет [5, 6].

Впервые N. сеrаnае была обнаружена у медоносных пчел на Тайване, затем в Европе, Америке, Китае, Вьетнаме и постепенно распространилась по всему миру [3, 5, 6]. В России этот возбудитель впервые обнаружен и диагностирован с использованием молекулярно-генетических методов на территории Тюменской области в 2009 г. [1]. В 2012 г. проведено первое масштабное исследование нозематоза с использованием ПЦР-диагностики [2].

Анализ 396 проб пчел, полученных с пасек европейской части страны, Урала и Алтая, показал широкое распространение заболевания и высокую степень зараженности особей нозематозом. Зараженность возбудителем N. apis составила 51,63%, N. сеrаnае — 48,37%. На территории Тюменской области нозематоз был обнаружен в 40,75% проб пчел с 22 из 34 исследованных пасек. При этом на девяти пасеках выявлен возбудитель N. apis, на девяти — N. сеrаnае и на четырех — оба возбудителя [2]. Анализ источника заражения семей нозематозом показал, что в большинстве случаев заболевание отмечалось при завозе новых пакетов пчел или поимке роев с соседних пасек.

На территории Томской области систематических исследований зараженности пчел нозематозом не проводилось. Периодически у пчел обнаруживались споры микроспоридий, которые диагностировались как Nosema apis. Данное исследование проведено с целью определения видовой принадлежности спор микроспоридий, обнаруженных в образцах с пасек Томской области.

Материалом для исследования послужили рабочие пчелы, полученные с 15 пасек шести районов области в течение пчеловодного сезона 2013 г. Исследовано 46 семей пчел. От каждой отбирали по 5-10 особей. Для установления видовой принадлежности микроспоридии проводили молекулярно-генетический анализ образца с применением метода мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР), позволяющего в одном эксперименте однозначно определить вид ноземы [5]. Использовали видоспецифичные праймеры, маркирующие последовательность 16S рДНК, для N. сеrаnае (218MITOC) и N. apis (321APIS). В случае наличия спор N. apis амплифицированный фрагмент ДНК имеет размер 321 пару нуклеотидов (п.н.), спор N. сеrаnае — размер фрагмента 218 или 219 п.н. [5].

Споры ноземы были выявлены в образцах четырех пасек (37,5%). Все они расположены в южных районах области, тогда как в северных районах нозематоз не обнаружен. В результате микроскопического исследования были выявлены споры ноземы, отличающиеся по морфологическим признакам — размеру и форме спор. Степень поражения пчел была разной: встречались образцы с единичными спорами (от 1 до 10 в поле зрения микроскопа) и образцы с очень сильным поражением. Методом мультиплексной ПЦР выявлено два вида ноземы: N. apis и N. сеrаnае (рис.).

Из четырех зараженных нозематозом пасек на трех выявлена нозема вида N. apis; на одной, расположенной в окрестностях г. Томска, — возбудитель N. сеrаnае. Это первый случай диагностики N. сеrаnае у пчел Томской области. Пасека, на которой выявлен возбудитель нозематоза N. сеrаnае, входит в состав личного подворья, включает в разные годы не более десяти семей и сформирована на основе пчел предположительно среднерусской породы, приобретенных пчеловодом в окрестностях г. Томска.

В период главного медосбора (июль) практикуется вывоз семей на разнотравные луга в пределах района. Летом 2012 г. пасека была пополнена двумя роями неизвестного происхождения. Зимовка 2012/13 г. прошла неблагополучно, отмечена гибель четырех семей из семи. В 2013 г. пасека была восстановлена за счет приобретения пчелиных семей в пределах Томского района. Из семи имевшихся на момент исследования семей в двух были обнаружены споры ноземы N. ceranae.

Исследование происхождения пчел пасеки по материнской линии с помощью анализа митохондриального генома (локус COI-COII) позволило выявить три варианта локуса мтДНК: PQQ и PQQQ (варианты, специфичные для среднерусской породы) и Q (вариант южных пород). Выявлено происхождение пяти семей по материнской линии от среднерусской породы и двух — от южных пород. Исследование основных показателей правого переднего крыла выявило несоответствие данных морфометрического и мтДНК-анализа для большинства особей, включая зараженных нозематозом (табл.). Такая картина является прямым следствием гибридизации пчел пасеки.

Варианты локуса COI— COII мтДНК и индексы крыла пчел из пораженных нозематозом семей 

Известно, что гибридные формы хуже адаптированы к изменяющимся внешним условиям, менее устойчивы к болезням. Наблюдаемая повсеместная массовая гибридизация пчел и образование помесных форм способствуют распространению заболеваний, которые ранее на пасеках не выявляли. Следует отметить, что в 2012 г. в том же селе были утрачены две небольшие частные пасеки, причем наблюдавшиеся на них неблагоприятные явления можно охарактеризовать как осенний слет пчел. Можно предположить, что распространение заболеваний связано с бессистемным и бесконтрольным завозом на территорию Томской области южных пород пчел, гибридов неизвестного происхождения.

Некоторые заболевания, например нозематоз типа С, которые раньше не регистрировались на территории Сибири, получают в настоящее время широкое распространение. Необходимы разработка системы контроля завозимых пчел, жесткая сертификация ввозимых семей и пакетов пчел на новые территории и ответственность производителей за свою продукцию. Создаваемый в Томской области при участии Томской областной администрации и Томского государственного университета пчелорепродуктор, как предполагается, позволит регулировать процесс ввоза несертифицированной продукции.

Н.В.ОСТРОВЕРХОВА, О.Л.КОНУСОВА,
Ю.Л.ПОГОРЕЛОВ,
Т.Н.КИРЕЕВД, М.Ю.САЛИК, Е.П.ГОЛУБЕВА
Томский государственный университет,
Биологический институт,
кафедра зоологии беспозвоночных, г. Томск
E-mail: nvostrov@mail.ru
ж-л «Пчеловодство» №9, 2014 г.

Литература

1. Зинатуллина З.Я., Игнатьева А.Н., Жигилева О.Н... Токарев Ю.С. «Азиатский» нозематоз в России // Пчеловодство. — 2011. — № 10.

2. Зинатуллина З.Я., Жигилева О.Н., Игнатьева А.Н., Токарев Ю.С. Нозематоз медоносных пчел на пасеках России // http://www.apiworld.ru/khochu-vsye-znat/iii-mezhdunarodnyy-forum-pchelovodov-medovyy-mir/ nozematoz-na-pasekakh-rossii/.

3. Chen Y-R, Huang Z.Y. Nosema ceranae, a newly identified pathogen Apis mellifera in the USA and Asia // Apidologie. —2010, — Vol.41.

4. Fries I., Feng F, Silva A. et al. Nosema ceranae n. sp. (Microspora, Nosematidae), morphological and molecular characterization of a microsporidian parasite of the Asian honey bee Apis cerana (Hymenoptera, Apidae) // Europ. J. Protistology. — 1996. — Vol. 32. — №3.

5. Fries I., Chauzal M-E, Chen Y-P. et al. Standard methods for Nosema research II In The COLOSS BEEBOOK by Eds Dietemann V., Ellis J.D., Neumann P., Volume II: Standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research // J. Apicult. Res. — 2013. — Vol. 52. — №1.

6. Higes M., Meana A., Bartolome C, Botias C, Martin-Hernandez R. Nosema ceranae (Microsporidia), a controversial 21" century honey bee pathogen // Environ Microbiol Reports. — 2013. — Vol. 5. — №1.

Понравилась статья? Расскажите друзьям:

Общайтесь со мной:

Хотите получать новые статьи на почту? Введите свой Email