И профилактика аскосфероза

Опубликовал: Petr_MS

Фитоаск — высокое качество зимовки семей, их весеннего развития и профилактика аскосфероза

Эффективность пчеловодства в основном зависит от качества зимовки семей, их адаптированности к условиям среды обитания и иммунитета. Продуктивность, адаптированность, иммунитет и зараженность семей — взаимозависимые параметры: изменение любого ведет к изменению всех остальных.

Качество зимовки семей — результат главным образом активности ферментов: пероксидазы, каталазы и дегидрогеназ. Восприимчивость семей пчел к патогенам обусловлена преимущественно активностью клеточного и гуморального иммунитета. Продуктивность же их в первую очередь определяется силой после зимовки и статусом здоровья.

В настоящее время одно из распространенных заболеваний в пчеловодстве — аскосфероз, вызываемый паразитическим грибом Ascosphaera apis [4, 5]. Применение в лечении его химических фунгицидов не дает кардинального решения проблемы, поскольку, с одной стороны, они загрязняют продукты пчеловодства и, с другой — ослабляют устойчивость семьи пчел к иным болезням.

Применение химических фунгицидов в конечном счете приводит к ухудшению качества зимовки семьи, усилению поражаемости ее различными возбудителями, потере иммунитета и снижению общей продуктивности. Поэтому необходимы такие средства, которые не оказывают негативного влияния на основные показатели здоровья семьи пчел. Этим требованиям могут удовлетворять препараты с противогрибковым эффектом, полученные из лекарственных растений.

Мы разработали препарат фитоаск, представляющий собой спиртовой экстракт растительного сбора с фунгицидным и стимулирующим эффектом [7, 8].

Активность каталазы определяли перманганатометрическим методом, данные выражали в (мкмоль/мин/мг) [12]. Оценку стимулирующего влияния лечебных подкормок на зимовку пчел проводили в октябре, феврале и в апреле. В это же время оценивали активность каталазы, а также видовой и количественный состав микробиоты заднего отдела кишечника пчел.

Определение фунгицидной активности экстракта растительного сбора фитоаск по отношению к аскосферозу, а также его стимулирующего влияния на пчелиную семью проводили на 30 семьях с признаками заболевания.

Семьи пчел разделили на три группы по 10 семей в каждой. Группы формировали методом пар-аналогов с учетом следующих показателей: сила семьи, количество печатного расплода и корма. Естественное поражение семей аскосферозом, оцененное по четырехбалльной системе, составляло 2,2-2,5 балла. При этом исходили из следующего правила: 3 балла — сильное поражение (50 и более больных личинок на расплодную рамку); 2 балла — среднее (10-49 личинок на расплодную рамку); 1 балл — слабое поражение (1-9 больных личинок на расплодную рамку); 0 — отсутствие поражения [9].

Качественный и количественный состав кишечной микрофлоры пчел определяли на 10 живых пчелах из каждой группы. У пчелы извлекали кишечник, помещали в стерильный бюкс, взвешивали и гомогенизировали в стерильной фарфоровой ступке в 1%-ной пептонной воде в соотношении 1:10. Делали посевы в объеме 0,025 мл в виде трех изолированных капель.

Через 24-72 ч инкубации при 37°С проводили учет выросших колоний и рассчитывали число микроорганизмов в 1 г кишечного содержимого пчелы по Бочкову. В качестве селективных питательных сред использовали: агар Эндо — для выделения энтеробактерий, агар Квасникова с 6% этанола — для лактобактерий, среду Блаурокка с неомицином — для бифидобактерий. Идентифицировали бактерий по культуральным, морфологическим и биохимическим свойствам. Видовую принадлежность устанавливали с использованием специальных каталогов, определителей и руководств [1, 2].

Фунгицидную активность исследуемого препарата изучали в сравнении с препаратом аскоцин в экспериментальной группе путем сопоставления числа пораженных аскосферозом личинок до и после лечения. Выбор данного препарата связан с его высокой эффективностью и низкой стоимостью.

Препарат аскоцин в концентрации 0,006% применяли в терапевтических целях, скармливая с сахарным сиропом (1:1). Маточный раствор препарата готовили согласно инструкции: растворяли 1 ампулу (0,48 мл) в 30 мл теплой кипяченой воды и вносили в 2 л (или 2 кг) сахарного сиропа (1:1). Рабочий раствор лечебного сахарного сиропа готовили непосредственно перед подкормкой и согласно инструкции занимали им 1/3 ячеек нижней части сотов из расчета 60-70 мл на рамку, обсиживаемую пчелами. Семьи обрабатывали 2-3-кратно с интервалом в пять дней.

Сироп с экстрактом растительного сбора фитоаск готовили следующим образом: жидкий растительный экстракт в 50%-ном этиловом спирте с содержанием 10% сухих веществ смешивали с сахарным сиропом в соотношении 1:6.

В 1-й подопытной группе семьи получали сахарный сироп с экстрактом растительного сбора фитоаск. Во 2-й — сироп с препаратом аскоцин. В контрольной группе пчел подкармливали сахарным сиропом без добавок. Перед началом эксперимента во всех группах провели ветеринарно-зоотехнические мероприятия по профилактике аскосфероза (чистку и термическую обработку ульев, пересадку семей пчел и др.).

Определение активности фермента каталазы проводили в субстрате кишечника пчел двух групп: 1-й подопытной (подкормленной осенью препаратом фитоаск) и контрольной. Ранее было показано, что подкормка семей пчел препаратом фитоаск повышает активность ферментов пероксидазы и каталазы, увеличивает содержание минеральных веществ, углеводов и липидов в организме в ноябре перед зимовкой [10]. Большой интерес представляет изучение изменений активности каталазы в течение зимовки пчел (табл. 1).

Максимальная активность каталазы отмечена в подопытной и контрольной группах в феврале. В 1-й подопытной группе активность каталазы в октябре на 110%, в феврале на 30%, в апреле на 92% превосходила контроль. Таким образом, активность каталазы в семьях пчел, подкормленных препаратом фитоаск, была выше в течение всей зимовки, что подтверждает его положительное влияние на подготовку пищеварительной системы пчел к этому сложному периоду.

В кишечном тракте взрослой медоносной пчелы выявлены энтеробактерии, молочнокислые бактерии, стафилококки, псевдомонады, дрожжи и плесневые грибы. Микробиоценоз кишечного тракта пчел представлен восемью видами бактерий и тремя видами грибов: энтеробактериями (Enterobacter aerogenes и Escherichia coli), лактобактерия-ми (Lactobacillus plantarum), стафилококками (Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus warneri, Staphylococcus aureus), энтерококками (Enterococcus faecalis), дрожжами (Candida krusei, Candida glabrata), плесневым грибом (Aspergillus niger).

1. Активность каталазы в ректальных железах пчел в осенне-весенний период, мкмоль/мин/мг

2. Количественный и качественный состав кишечной микрофлоры пчел в течение зимовки, n=30, lg КОЕ/г

Как видно из таблицы 2, для обеих групп характерен рост численности микрофлоры в заднем отделе кишечника пчел с октября по апрель, что согласуется с литературными данными [3]. В контрольной группе общее число микроорганизмов в 1 г содержимого кишечника к апрелю повышалось примерно на 40%. При рассмотрении каждой группы микроорганизмов установили, что количество энтеробактерий в контрольной группе возросло на 20%, стафилококков — на 16%, дрожжей — на 34,5%, а плесневых грибов — на 212,5%. В 1-й подопытной группе количество представителей рода Lactobacillus было больше на 46% в октябре, на 42% в феврале и на 20% апреле, чем в контроле.

Выявлена интересная особенность — изменение видового состава микроорганизмов в кишечнике пчел. Так, в образцах 1-й подопытной группы в феврале и апреле не диагностировались представители Staphylococcus epidermidis, хотя в октябре они отмечались. В образцах же контрольной группы наоборот, этот вид был обнаружен в апреле, хотя в октябре и феврале он не был зафиксирован. Дрожжи Candida tropicalis не были обнаружены в подопытной группе в октябре, но в апреле их количество превысило значение контрольной группы. Другой отличительной особенностью микробиоценоза кишечника пчел можно считать наличие Staphylococcus aureus в апреле в контрольной группе.

В 1-й подопытной группе практически отсутствовали представители плесневых грибов, что, вероятно, связано с антимикотической активностью препарата фитоаск [6]. Возможно, препарат селективно воздействует на микрофлору заднего отдела кишечника пчел, стимулируя размножение лактобактерий и подавляя жизнедеятельность плесневых грибов.

Известно, что в состав микрофлоры медоносной пчелы могут входить микроорганизмы различных физиологических групп, выполняющие определенные функции [11]. Можно предположить, что нормальная кишечная микрофлора пчел определяет состояние семьи [11]. Однако, несмотря на большое количество исследований по данной теме, вопрос о нормальной микрофлоре кишечника пчел остается открытым [1, 3].

Весенний этап работы был продолжен на пасеке, неблагополучной по аскосферозу. Семьи пчел были собраны в группы со средней (примерно 2,3 балла) степенью поражения. Это свидетельствует о том, что на рамке встречалось в среднем от 11 до 100 мумифицированных личинок. В группах были и семьи, имеющие более 100 пораженных личинок.

После проведения необходимых зоотехнических мероприятий по перегону в чистые и продезинфицированные ульи семьи пчел подопытных групп двукратно подкормили сиропом с препаратами аскоцин и фитоаск. Контрольная группа, соответственно, получила сироп без добавок.

Об эффективности обработок семей пчел судили по числу пораженных аскосферозом личинок до и после проведения опытов. Каждую декаду подсчитывали число инфицированных личинок.

При двукратной подкормке препаратом фитоаск зараженность семей аскосферозом снизилась на 59%. В случае с препаратом аскоцин снижение составило 76%. В подопытных группах в течение месяца прекратился вынос единичных мумифицированных личинок. В контрольной группе зараженность аскосферозом в исследуемый период увеличивалась в 1,14 раз, но в конце июня, через два месяца после эксперимента, и в ней исчезли клинические признаки аскосфероза.

Была проведена оценка продуктивности семей пчел после подкормки препаратами аскоцин и фитоаск. В контрольной группе от одной семьи пчел было получено в 2015 г. в среднем (19±0,5) кг товарного меда; в 1-й подопытной группе, получавшей препарат фитоаск — (29±2) кг, в 2-й подопытной группе, получавшей препарат аскоцин — (24±2) кг.

Таким образом, при подкормке семей пчел препаратом фитоаск, обладающим фунгицидным и стимулирующим действием, происходит оздоровление расплода, повышение зимостойкости, продуктивности и весеннего развития.

Р.Г.ФАРХУТДИНОВ¹, Ф.Г.ЮМАГУЖИН²,
Р.А.ИЛЬЯСОВ³, В.М.ШАФИКОВА¹,
Н.А.УРАЗБАХТИНА^2
1ФГБОУ ВО «Башкирский государственный университет»,
²ФГБОУ ВО «Башкирский государственный
аграрный университет»,
ФГБУН Институт биохимии и генетики УНЦ РАН
г. Уфа
ж-л «Пчеловодство» №6, 2016 г.

Литература

1. Ляпунов Я.Э., Кузяев Р.З., Хисматуллин Р.Г., Безгодова О.А. Энтеробактерии кишечника зимующих пчел Apis mellifera mellifera L. // Микробиология. — 2008. — Т. 77.— №3.

2. Полтев В.И., Гриценко И.Н., Егорова А.И. и др. Микрофлора насекомых. — Новосибирск, 1969.

3. Сердюченко И.В. Микробиоценоз кишечного тракта медоносных пчел и его коррекция: автореф... дисс... канд. вет. наук. — Краснодар, 2013.

4. Смирнов A.M., Туктаров В.Р. Болезни и вредители медоносных пчел. — Уфа, 2004.

5. Туктарова Ю.В., Фархутдинов Р.Г. Особенности ми-фаций спор Ascosphaera apis на территории продуктивного лёта пчел // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. — 2013. — № 1 (9).

6. Фархутдинов Р.Г., Туктарова Ю.В., Ильясов Р.А., Иванов А.А., Воронков Ю.П., Шафикова В.М. Состав для стимуляции развития семей пчел, профилактики и лечения аскосфероза (Патент РФ 2552672 от 10.06.2015).

7. Фархутдинов Р.Г., Ильясов Р.А., Юмагужин Ф.Г., Туктарова Ю.В., Шафикова В.М., Абдуллин М.Ф. Фунгицид и стимулятор семьи пчел растительного происхождения // Пчеловодство. — 2014. — № 9.

8. Фархутдинов Р.Г., Лукьянцев М.А., Туктарова Ю.В., Шафикова В.М. Исследование фунгицидных свойств лекарственных растений и применение фитосбора для лечения аскосфероза у пчел // Материалы I Межд. науч. конф. «Лекарственные растения: фундаментальные и прикладные проблемы». — Новосибирск, 2013.

9. Фархутдинов Р.Г., Юмагужин Ф.Г., Ильясов Р. А., Шафикова В.М. Оценка влияния препарата «Фитоаск» на качество зимовки и весеннего развития // Биомика. — 2016. — Т. 8. — №2.

10. Чечеткина У.Е., Евтеева Н.И., Речкин А.И. Сравнение пейзажа энтеробактерий медоносных пчел Apis mel-lifera mellifera L. // Вестник Нижегородского университета им. Н.И.Лобачевского. — 2010. — №2 (2).

11. Шафикова В.М., Фархутдинов Р.Г. Влияние фитопрепарата «Фитоаск» на активность ферментов каталазы и пероксидазы у пчелы медоносной Apis mellifera mellifera // Вестник Башкирского университета. — 2013. — Т. 18. — № 4.

12. Юмагужин Ф.Г., Сафаргалин А.Б. Сезонные изменения активности каталазы ректальных желез // Пчеловодство. — 2013. — № 8.

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ: Фархутдинов Рашит Габдулхаевич, д-р биол. наук, проф. кафедры биохимии и биотехнологии, тел./факс +7 (347) 229-96-71, e-mail: frg2@mail.ru; Юмагужин Фитрат Гилъмитдинович, д-р биол. наук, директор Зауральского филиала, г. Сибай, тел./факс (34775) 5-73-78, e-mail: fitrat63@mail.ru; Ильясов Рустем Абузарович, канд. биол. наук, ст. науч. сотр. лаборатории биохимии адаптивности насекомых, тел./факс +7 (347) 235-60-88, e-mail: apismell@hot-mail.com; Шафикова Венера Марселевна, аспирант кафедры биохимии и биотехнологии, тел./факс +7 (347) 229-96-71, e-mail: frg2@mail.ru; Уразбахтина Нурия Анасовна, канд. биол. наук, доцент кафедры почвоведения, агрохимии и земледелия, тел. +7 (347) 228-91-77, e-mail: unurl561@rambler.ru.

Понравилась статья? Расскажите друзьям:

Общайтесь со мной:

Хотите получать новые статьи на почту? Введите свой Email