07
Фторхинолоны против возбудителей европейского гнильца
Опубликовал: Petr_MSЗаболевание пчел европейским гнильцом остается актуальной проблемой пчеловодов. Несмотря на достаточную изученность данного заболевания, в настоящее время в зарубежье изыскивают новые методы диагностики и лечения гнильцов, уделяя особое внимание уменьшению рецидивов болезни после примененной терапии [5]. К сожалению, невзирая на распространенность гнильцовых заболеваний, изучению этой проблемы в нашей стране не уделяется достаточного внимания, особенно в последние годы. Поэтому в период интенсивного развития пчеловодства, одного из важных направлений экономики, необходимо проводить более детальные исследования на гнильцах [3]. С этой целью мы изучали распространенность данной болезни в регионе, исследовали терапевтическую эффективность новых, экологически безопас-ных препаратов.
Среди современных синтетических бактерицидов нового поколения принадлежит важное место высокоэф-фективным препаратам хинолонового ряда, обладающим широким спектром активности и механизмом действия, отличающимся от других исполь-зуемых в настоящее время групп антимикробных препаратов [2]. Для исследований были выбраны пефлоксацин (ПФЦ) и энрофлоксацин (ЭФЦ). Среди других свойств этих препаратов нас заинтересовала высокая степень био-трансформации, одним из возможных эф-фектов которой предпола-гается снижение остаточ-ных количеств антибиотика в меде и в дру-гих продуктах пчеловодства, что необходимо ис-следовать в производствен-ных условиях. Был взят для сравнения антибиотик окситетрациклин (ОТЦ), используемый в пчеловодстве для лечения гнильцовых заболеваний расплода пчел.
Чувствительность Melissococcus pluton, Bacillus alvei и Enterococcus faecalis к выбранным антибиотикам определяли по общепринятым методикам [1]. С целью выявления минимальной бактерицидной концентрации (МБК) использовали метод серийных разведений в агаре, применяя последовательные десятикратные разведения антибиотиков. Исследование проводили в трехкратной повторности (табл. 1).
По данным таблицы можно проследить, что минимальной концентрацией для проявления бактерицидной активности ПФЦ и ЭФЦ по отношению ко всем возбудителям является 10 мкг/мл (0,001 %-ный раствор), а для ОТЦ этот показатель соответствует 10 000 мкг/мл (1 %-ный раствор препарата).
1. Выявление МБК для каждого возбудителя методом серийных разведений в агаре
Применение диско-диффузного метода дало более наглядные результаты. При этом также использовали последовательные десятикратные разведения антибиотиков. Диаметр зоны задержки роста микроорганизма измеряли с точностью до1 мм, при этом критерием были следующие величины: зона стерильности до14 мм— малая чувствительность; от 15 до25 мм— достаточная чувствительность;26 мми выше — высокая чувствительность. Исследование проводили в трехкратной повторности (рис.).
Диаграмма ярко иллюстрирует более высокую антибиотикочувствительность Ent. faecalis по сравнению с другими возбудителями и меньшую чувствительность к данным концентрациям анаэробного возбудителя европейского гнильца М. pluton.
Для ингибирования роста всех исследуемых возбудителей самым низким показателем среди испытуемых антибиотиков является концентрация пефлоксацина 0,01% (см. рис.). Нами выявлена минимальная концентрация данного антибиотика, при которой чувствительность для наиболее устойчивого возбудителя будет соответствовать категории достаточной чувствительности.
По результатам поставленных опытов можно проследить, что среди исследованных возбудителей наиболее устой-чивым к антибиотикам является М. pluton. Поэтому при выборе терапевтической концентрации антибиотика для лечения европейского гнильца мы ориентировались на чувствительность данного возбудителя.
Для изучения терапевтической эффективности пефлоксацина на пасеках Белорецкого и Уфимского районов Республики Башкортостан использовали по 28 семей, больных европейским гнильцом. На каждой пасеке сформировали 4 группы по прин-ципу пар-аналогов. Лечебные обработки пчелосемей проводили после комп-лекса ветеринарно-санитарных мероприятий согласно инструкции [2]. Результаты учитывали визуально по состо-янию пчелиного расплода, подсчитывая поражен-ных личинок, а также лабораторными ис-следованиями проб расплода из ульев до проведения опытов и через 6, 9 и 12 дней после применения пефлоксацина.
Пефлоксацин в гнезда подопытных семей пчел вносили двумя способами: скармливанием в составе сахарного сиропа (1:1) и опрыскиванием сотовых рамок вместе с расплодом лечебным раствором, приготовленным на основе сахарного сиропа (1:4). В обоих случаях концентрация антибиотика в растворах составляла 0,01%. Лечебный сироп пчелам давали дважды с интервалом в 2 дня из расчета 100-120 мл на улочку. Опрыскивание проводили ежедневно в тече-ние трех дней, при норме расхода 10-15 мл на рамку с пчелами. Для сравнения терапевтического эффекта испытуемого антибиотика третью группу пчелиных семей лечили окси-тетрациклином в рекомендуемой дозе — 1,0 г на 1 л сахарного сиропа (1:1), который также давали дважды с интер-валом в 2 дня из рас-чета 100-120 мл на рамку. Четвертая груп-па семей пчел служила контролем без лечения, то есть этим семьям давали подкормку без антибиотиков (табл. 2).
Количество поражен-ного расплода в семьях пчел до и после обработки
Способы применения препарата
Количество поражен-ных личинок, шт.
Терапевтический эффект, %
до опыта
после применения препарата, дни
6
9
12
Скармливание ПФЦ с сиропом 47,6±3,5
27,0±2,1
10,3±0,8
3,1±0,4
93,6
Опрыскивание раствором ПФЦ 47,2±3,1
24,3±1,5
9,2±0,6
2,2±0,5
95,2
Контроль с ОТЦ 48,0±3,6
29,7±2,6
13,1±1,3
6,0±0,6
87,8
Контроль без антибиотиков 50,0±5,3
55,5±5,8
57,7±6,1
54,3±5,7
0
Применение пефлоксацина для лечения семей пчел, поражен-ных европейским гнильцом, показало его высокую терапевтическую эф-фективность — более 90%. Причем наибольшая эффективность наблюдалась при внесе-нии препарата путем опрыскивания с сахарным сиропом. Однако, учитывая большую трудоемкость обработки ульев опрыскиванием и недостоверную разницу в показателях, наиболее оптимальным вариантом будет скармливание сахарного сиропа с препаратом. Нужно отметить, что по своей эф-фективности оба варианта при внесении препарата пефлоксацин достоверно превышали действие окситетрациклина.
Полученные экспериментальные данные показали высокую бактерицидную активность испытуемых фторхинолонов к возбудителям европейского гнильца, о чем свидетельствуют низкие значения минимальной бактерицидной концентрации препаратов.
Г.Я.СУЮНДУКОВА,
аспирант; В.Р.ТУКТАРОВ,
доктор биологических наук, профессор
Башкирский государственный аграрный университет
ж-л «Пчеловодство» №4, 2013 г.Литература
1. Антонов Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии: Бактериальные инфекции: справочник — М., 1986.
2. Гавриков А.В., Воронкова В.В. Фармакодинамический профиль и противомикробная активность фторхинолонов // Ветеринария. — 2010. — №9.
3. Клочко Р.Т., Луганский С.Н., Котова А.А. О карантинных и ограничительных мероприятиях в пчеловодстве // Пчеловодство. — 2012. — №6.
4. Харитонов Н.Н. Влияние различных факторов на устойчивость пчел к заболеваниям // Пчеловодство. — 2012. —№4.
5. Doughty S. et al. Evaluating alternative antibiotics for control of European Foulbrood disease / S.Doughty, J.Luck, R.Goodman. — Barton, 2004.